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  • 氣相色譜定性定量分析

    發(fā)布于 2011/07/22閱讀(2373)來源 zxj標簽 GC9217

    摘要

    氣相色譜定性定量分析

    內(nèi)容

    氣相色譜定性定量分析 
     
    一.定性分析

        氣相色譜的優(yōu)點是能對多種組分的混合物進行分離分析,(這是光譜、質(zhì)譜法所不能的)。但由于能用于色譜分析的物質(zhì)很多,不同組分在同一固定相上色譜峰出現(xiàn)時間可能相同,進憑色譜峰對未知物定性有一定困難。對于一個未知樣品,首先要了解它的來源、性質(zhì)、分析目的;在此基礎(chǔ)上,對樣品可有初步估計;再結(jié)合已知純物質(zhì)或有關(guān)的色譜定性參考數(shù)據(jù),用一定的方法進行定性鑒定。

     (一)利用保留值定性

     1. 已知物對照法  各種組分在給定的色譜柱上都有確定的保留值,可以作為定性指標。即通過比較已知純物質(zhì)和未知組分的保留值定性。如待測組分的保留值與在相同色譜條件下測得的已知純物質(zhì)的保留值相同,則可以初步認為它們是屬同一種物質(zhì)。由于兩種組分在同一色譜柱上可能有相同的保留值,只用一根色譜往定性,結(jié)果不可靠。可采用另一根極性不同的色譜柱進行定性,比較未知組分和已知純物質(zhì)在兩根色譜柱上的保留值,如果都具有相同的保留值,即可認為未知組分與已知純物質(zhì)為同一種物質(zhì)。

        利用純物質(zhì)對照定性,首先要對試樣的組分有初步了解,預(yù)先準備用于對照的已知純物質(zhì)(標準對照品)。該方法簡便,是氣相色譜定性中最常用的定性方法。

      2. 相對保留值法 

        對于一些組成比較簡單的已知范圍的混合物或無已知物時,可選定一基準物按文獻報道的色譜條件進行實驗,計算兩組分的相對保留值:

                           (5)

      式中:i-未知組分;s-基準物。

        并與文獻值比較,若二者相同,則可認為是同一物質(zhì)。(ris僅隨固定液及柱溫變化而變化。)

        可選用易于得到的純品,而且與被分析組分的保留值相近的物質(zhì)作基準物。

      2. 保留指數(shù)法 

        又稱為Kovats指數(shù),與其它保留數(shù)據(jù)相比,是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。

        保留指數(shù)是將正構(gòu)烷烴作為標準物,把一個組分的保留行為換算成相當于含有幾個碳的正構(gòu)烷烴的保留行為來描述,這個相對指數(shù)稱為保留指數(shù),定義式如下:

                  (6)

          IX為待測組分的保留指數(shù),z與 z+n 為正構(gòu)烷烴對的碳數(shù)。規(guī)定正己烷、正庚烷及正辛烷等的保留指數(shù)為600、700、800,其它類推。

        在有關(guān)文獻給定的操作條件下,將選定的標準和待測組分混合后進行色譜實驗(要求被測組分的保留值在兩個相鄰的正構(gòu)烷烴的保留值之間)。由上式計算則待測組分X的保留指數(shù)IX,再與文獻值對照,即可定性。

      3. 聯(lián)用技術(shù)

        氣相色譜對多組分復(fù)雜混合物的分離效率很高,但定性卻很困難。而質(zhì)譜、紅外光譜和核磁共振等是鑒別未知物的有力工具,但要求所分析的試樣組分很純。因此,將氣相色譜與質(zhì)譜、紅外光譜、核磁共振譜聯(lián)用,復(fù)雜的混合物先經(jīng)氣相色譜分離成單一組分后,再利用質(zhì)譜儀、紅外光譜儀或核磁共振譜儀進行定性。未知物經(jīng)色譜分離后,質(zhì)譜可以很快地給出未知組分的相對分子質(zhì)量和電離碎片,提供是否含有某些元素或基團的信息。紅外光譜也可很快得到未知組分所含各類基團的信息。對結(jié)構(gòu)堅定提供可靠的論據(jù)。近年來,隨著電子計算機技術(shù)的應(yīng)用,大大促進了氣相色譜法與其它方法聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展。

     二.定量分析

        在一定的色譜操作條件下,流入檢測器的待測組分i的含量mi(質(zhì)量或濃度)與檢測器的響應(yīng)信號(峰面積A或峰高h)成正比:

                          mi = fiAi      或       mi= fi hi

        式中,fi 為定量校正因子。要準確進行定量分析,必須準確地測量響應(yīng)信號,確求出定量校正因子fi 。

        此兩式是色譜定量分析的理論依據(jù)。

    1.峰面積的測量

    (1)峰高乘半峰寬法:對于對稱色譜峰,可用下式計算峰面積:

                           (7)

         在相對計算時,系數(shù)1.06可約去。

     (2)峰高乘平均峰寬法:

                      (8)

    對于不對稱峰的測量,在峰高0.15和0.85處分別測出峰寬,由下式計算峰面積:

         此法測量時比較麻煩,但計算結(jié)果較準確。

    (3)自動積分法 

         具有微處理機(工作站、數(shù)據(jù)站等),能自動測量色譜峰面積,對不同形狀的色譜峰可以采用相應(yīng)的計算程序自動計算,得出準確的結(jié)果,并由打印機打出保留時間和A或h等數(shù)據(jù)。 

      2. 定量校正因子 

        由于同一檢測器對不同物質(zhì)的響應(yīng)值不同,所以當相同質(zhì)量的不同物質(zhì)通過檢測器時,產(chǎn)生的峰面積(或峰高)不一定相等。為使峰面積能夠準確地反映待測組分的含量,就必須先用已知量的待測組分測定在所用色譜條件下的峰面積,以計算定量校正因子。

                          (9)

     式中: fi  稱為絕對校正因子,即是單位峰面積所相當?shù)奈镔|(zhì)量。它與檢測器性能、組分和流動相性質(zhì)及操作條件有關(guān),不易準確測量。在定量分析中常用相對校正因子,即某一組分與標準物質(zhì)的絕對校正因子之比,即:

                      (10)

    式中: Ai、As分別為組分和標準物質(zhì)的峰面積; mi、ms分別為組分和標準物質(zhì)的量。mi、ms可以用質(zhì)量或摩爾質(zhì)量為單位,其所得的相對校正因子分別稱為相對質(zhì)量校正因子和相對摩爾校正因子,用 fm 和 fM 表示。使用時常將“相對”二字省去。

    校正因子一般都由實驗者自己測定。準確稱取組分和標準物,配制成溶液,取一定體積注入色譜柱,經(jīng)分離后,測得各組分的峰面積,再由上式計算fm 或 fM 。 

    4. 定量方法

    (1)歸一化法:如果試樣中所有組分均能流出色譜柱,并在檢測器上都有響應(yīng)信號,都能出現(xiàn)色譜峰,可用此法計算各待測組分的含量。其計算公式如下:

         (11)

         歸一化法簡便,準確,進樣量多少不影響定量的準確性,操作條件的變動對結(jié)果的影響也較小,尤其適用多組分的同時測定。但若試樣中有的組分不能出峰,則不能采用此法。

     (2)內(nèi)標法:

        內(nèi)標法是在試樣中加入一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標物來測定組分的含量。內(nèi)標物應(yīng)選用試樣中不存在的純物質(zhì),其色譜峰應(yīng)位于待測組分色譜峰附近或幾個待測組分色譜峰的中間,并與待測組分完全分離,內(nèi)標物的加入量也應(yīng)接近試樣中待測組分的含量。具體作法是準確稱取m(g)試樣,加入ms(g)內(nèi)標物,根據(jù)試樣和內(nèi)標物的質(zhì)量比及相應(yīng)的峰面積之比,由下式計算待測組分的含量:

                          (12)

                (13)

     由于內(nèi)標法中以內(nèi)標物為基準,則 fs=1。

        內(nèi)標法的優(yōu)點是定量準確。因為該法是用待測組分和內(nèi)標物的峰面積的相對值進行計算,所以不要求嚴格控制進樣量和操作條件,試樣中含有不出峰的組分時也能使用,但每次分析都要準確稱取或量取試樣和內(nèi)標物的量,比較費時。

        為了減少稱量和測定校正因子可采用內(nèi)標標準曲線法 ——簡化內(nèi)標法:

        在一定實驗條件下,待測組分的含量mi與Ai/As成正比例。先用待測組分的純品配置一系列已知濃度的標準溶液,加入相同量的內(nèi)標物;再將同樣量的內(nèi)標物加入到同體積的待測樣品溶液中,分別進樣,測出Ai/As,作 Ai/As—m  或Ai/As—C 圖,由Ai(樣)/As 即可從標準曲線上查得待測組分的含量。

    (3)外標法:取待測試樣的純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標準溶液,分別取一定體積,進樣分析。從色譜圖上測出峰面積(或峰高),以峰面積(或峰高)對含量作圖即為標準曲線。然后在相同的色譜操作條件,分析待測試樣,從色譜圖上測出試樣的峰面積(或峰高),由上述標準曲線查出待測組分的含量。

    外標法是最常用的定量方法。其優(yōu)點是操作簡便,不需要測定校正因子,計算簡單。結(jié)果的準確性主要取決于進樣的重視性和色譜操作條件的穩(wěn)定性。
     

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