島津LC10AT型高效液相色譜儀操作規程

　　島津LC-10AT型高效液相色譜儀操作規程

　　1.目的

　　規范島津LC-10AT型高效液相色譜儀的使用。

　　2.范圍

　　適用于島津LC-10AT型高效液相色譜儀的使用。

　　3.職責

　　質檢員對本規程的實施負責。

　　4.規程

　　4.1 系統組成：本系統由2個LC-10ATvp溶劑輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne 7725i手動進樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測器、N2000色譜數據工作站和電腦等組成，另外還包括打印機、不間斷電源等輔助設備。

　　4.2 準備

　　4.2.1 準備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。

　　4.2.2 根據待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱(注意方向)和定量環。

　　4.2.3 配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統時配制)，用合適的0.45μm濾膜過濾。

　　4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常。

　　4.3 開機：接通電源，依次開啟不間斷電源、B泵、A泵、檢測器，待泵和檢測器自檢結束后，打開打印機、電腦顯示器、主機，最后打開色譜工作站。

　　4.4 參數設定

　　4.4.1 波長設定：在檢測器顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需波長值，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出到初始屏幕。

　　4.4.2 流速設定：在A泵顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數字鍵輸入所需的流速(柱在線時流速一般不超過1ml/min)，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。

　　4.4.3 流動相比例設定：在A泵顯示初始屏幕時，按[conc]鍵，用數字鍵輸入流動相B的濃度百分數，按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。

　　4.4.4 梯度設定

　　4.4.4.1 在A泵顯示初始屏幕時，按[edit]鍵，[Enter]鍵;

　　4.4.4.2 用數字鍵輸入時間，按[Enter]鍵，重復按[func]鍵選擇所需功能(FLOW設定流速，BCNC設定流動相B的濃度)，按[Enter]鍵，用數字鍵輸入設定值，按[Enter]鍵;

　　4.4.4.3 重復上一步設定其它時間步驟;

　　4.4.4.4 用數字鍵輸入停止時間，重復按[func]鍵直至屏幕顯示STOP，按[Enter]鍵。按[CE]鍵退出。

　　4.5 更換流動相并排氣泡

　　4.5.1 將A/B管路的吸濾器放入裝有準備好的流動相的儲液瓶中;

　　4.5.2 逆時針轉動A/B泵的排液閥180°，打開排液閥;

　　4.5.3 按A/B泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以9.9ml/min的流速沖洗，3min(可設定)后自動停止;

　　4.5.4 將排液閥順時針旋轉到底，關閉排液閥。

　　4.5.5 如管路中仍有氣泡，則重復以上操作直至氣泡排盡。

　　4.5.6 如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設為規定值。

　　4.6 平衡系統

　　4.6.1 按《N2000色譜數據工作站操作規程》打開“在線色譜工作站”軟件，輸入實驗信息并設定各項方法參數后，按下“數據收集”頁的 [查看基線] 按鈕。

　　4.6.2 等度洗脫方式

　　4.6.2.1 按A泵的[pump]鍵，A、B泵將同時啟動，pump指示燈亮。用檢驗方法規定的流動相沖洗系統，一般最少需6倍柱體積的流動相。

　　4.6.2.2 檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應予以排除。

　　4.6.2.3 觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按4.5.6操作。

　　4.6.2.4 觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時，可認為系統已達到平衡狀態，可以進樣。

　　4.6.3 梯度洗脫方式

　　4.6.3.1 以檢驗方法規定的梯度初始條件，按4.6.2項下方法平衡系統。

　　4.6.3.2 在進樣前運行1~2次空白梯度。方法：按A泵的[run]鍵，prog.run指示燈亮，梯度程序運行;程序停止時，prog.run指示燈滅。

　　4.7 進樣

　　4.7.1 進樣前按檢測器[zero]鍵調零，按軟件中 [零點校正] 按鈕校正基線零點，再按一下 [查看基線] 按鈕使其彈起。

　　4.7.2 用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。