高效液相色譜系統適用性試驗設計的變化趨勢
高效液相色譜法（HPLC 法）是藥物分析中常用的一種定性、定量色譜分析方法。具有較強的專屬性，相對較高的檢測靈敏度和良好的量化功能。2005版《中國藥典》使用 HPLC 法的品種中，色譜系統適用性試驗設計有了較大的變化：指標更加細致、周到，檢測更重實效，色譜系統適用性的試驗用溶液的制備方法也呈現多樣化，體現出一些變化趨勢。

１.色譜系統適用性試驗的設計與實驗目的更加匹配
系統適用性試驗的嚴格細膩程度取決于實驗目的。首先應考慮色譜系統被用于何種實驗，根據實驗目的來設計系統適用性試驗。如果一個 HPLC 方法僅用于定性鑒別，就其色譜系統的適用性試驗而言可以相對簡單寬松，只要可以確保被測成分峰與其他色譜峰有一定的分離度，具有適宜的出峰時間即可達到實驗目的。

如果用于定量分析（如含量測定），則除要保證被測成分峰具有適宜的出峰時間外，還需檢驗系統是否能夠保證被測成分峰與其他色譜峰完全分離，分離度一般應在1.5以上，同時還應測試被測成分峰峰面積的重復性是否良好，對照品溶液連續進樣5針的峰面積相對標準偏差應不大于２％，被測成分峰的峰型也應基本對稱，以保證分離效果和測量精度。對于小峰（如占總面積10％以下的色譜峰）峰面積的定量，或用峰高法定量時，就應對拖尾因子或對稱因子加以嚴格的規定，一般來說，拖尾因子應在 0.95～1.05之間，因為峰的對稱性對測量結果影響較大。

如果檢查某種藥品的有關物質，且還需要分別檢查單個雜質和雜質總量，那么系統適用性試驗還應有一個重點，就是要有常見雜質難分離物質對分離度的測定指標。此外系統的檢測靈敏度試驗也就相對比較重要。如鹽酸二甲雙胍的有關物質檢查項下要求： 鹽酸二甲雙胍與雙氰胺的分離度應大于1.5，檢測靈敏度要求調節雙氰胺峰高為滿量程的10％。 如 果色譜系統是一個梯度洗脫系統，有時一個難分離物質對分離度的測試也不能完全達到實驗目的。如果在梯度變化的前后均有需要檢測的雜質，分離度的測定指標一般應根據需要在梯度變化之前和之后都可加以制訂。在梯度洗脫系統中某個成分峰的保留時間也經常用來做系統適用性檢測的指標，給出吐峰時間范圍，如頭孢地尼，主成分頭孢地尼峰的保留時間要求22分鐘，Ｅ-異構體峰保留時間約為33分鐘，理論板數按頭孢地尼峰計算應不低于 7000。

在2000年版《中國藥典》中，有些標準色譜系統適用性試驗的要求就與其色譜系統的實驗目的不完全匹配。如有些品種含量測定與有關物質共用一套色譜系統，且有關物質還需要分別檢查單個雜質和雜質總量，但系統適用性試驗指標僅有一個理論板數的要求，或對分離度的設計為“被測成分峰與相鄰雜質峰間的分離度應符合規定”這樣一個對系統性能緩沖空間很大的一個指標要求。在2005年版《中國藥典》中，這種實屬很虛的指標開始減少。如2000年版頭孢曲松反式異構體（光降解產物）峰的保留時間應為頭孢曲松峰保留時間的1.3倍，兩峰之間的分離度應不小于3.0，理論板數按頭孢曲松峰計算應不低于1500，2005年版修訂為頭孢曲松峰和頭孢曲松反式異構體峰間的分離度應不小于6.0。

２.系統適用性試驗用溶液的制
備更加注重方便性、實用性和可操作性系統適用性試驗用溶液的配制方法，最簡單的莫過于用主成分對照品與雜質對照品混合配制，但有些雜質對照品不能得到，如性質不穩定或與主成分理化性質太接近，分離提取技術要求太高，成本太大等，但這些雜質峰恰恰又是與主成分峰最難分離的色譜峰，且較常存在于 藥 品中需要檢查的，在2005年版《中國藥典》中，這一問題得到了較好的解決。如喹諾酮類藥物中較常出現光降解產物，而此光降解產物是引起這類藥物不良反應的主要因素，所以需要在有關物質檢查中做為重點檢測的雜質之一。

因 此 ，在2005年 版 《 中 國 藥 典 》中，這些藥物系統適用性試驗用溶液的制備就通 過把對照 品溶液進行 光 照 處理，得到能產生明顯光降解產物色譜峰的溶液。

3.實驗過程、操作步驟趨于嚴謹規范
色譜系統適用性試驗設計、規定的完備、靈敏度檢測試驗的規范，溶劑的選擇、溶解制備方式等各方面均體現出對實驗目的的理解更加明確，對實驗細節考慮更加嚴謹周到，標準的書寫格式均更 加規范 、統 一 ，如2005年 版《中 國 藥典》收載的 β-內酰胺類抗生素中檢查高分子聚合物的品種將原來收載的8個品種的色譜條件與系統適用性試驗均修訂與新增 13個品種項下書寫格式相同，系統適用性試驗統一為理論板數以藍色葡聚糖2000峰計算均不低于……。拖尾因子均應小于2.0，在兩種流動相系統中藍色葡聚糖 2000峰保留時間比值均應在0.93～1.07之間，對照品溶液主峰與供試品溶液中聚合物峰與相應色譜系統中藍色葡聚糖 2000峰保留時間的比值均應在0.93～1.07之間。