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  • Agilent1100液相基本操作步驟

    發(fā)布于 2011/03/07閱讀(2911)標(biāo)簽 Agilent11

    摘要

    Agilent1100液相基本操作步驟 ,操作規(guī)程,維修

    內(nèi)容

    一)、開機(jī):
        1、打開計(jì)算機(jī),進(jìn)入Windows NT (或Windows 2000)畫面,并運(yùn)行Bootp Server程序。
         2、打開 1100 LC 各模塊電源。
         3、待各模塊自檢完成后,雙擊Instrument 1 Online圖標(biāo),化學(xué)工作站自動(dòng)與1100LC
             通訊,進(jìn)入的工作站畫面如下所示。
       4、從“View”菜單中選擇“Method and Run control”畫面, 單擊”View”菜單中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”標(biāo)志,來(lái)調(diào)用所需的界面。
       5、把流動(dòng)相放入溶劑瓶中。
       6、打開Purge閥。
       7、單擊Pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊Setup pump選項(xiàng),進(jìn)入編輯畫面。
       8 、設(shè)Flow:5ml/min,單擊OK。
       9、單擊Pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊Pump control選項(xiàng),選中On,單擊OK,則系統(tǒng)開始Purge,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無(wú)氣泡為止,切換通道繼續(xù)Purge,直到所有要用通道無(wú)氣泡為止。
       10、單擊Pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊Pump Control選項(xiàng),選中Off,單擊Ok關(guān)泵, 關(guān)閉
    Purge  valve
       11、單擊Pump圖標(biāo),出現(xiàn)參數(shù)設(shè)定菜單,單擊Setup pump選項(xiàng),進(jìn)入Pump編輯畫面,設(shè)Flow:1.0ml/min。
       12、單擊泵下面的瓶圖標(biāo),如圖所示(以二元泵為例),輸入溶劑的實(shí)際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。單擊O(二)數(shù)據(jù)采集方法編輯:
    1、開始編輯完整方法:
         ●   從“Method”菜單中選擇“Edit entire method” 項(xiàng),如上圖所示選中除“Data    analysis ”外的三項(xiàng),單擊Ok,進(jìn)入下一畫面。
    2、方法信息:
    ●    在“Method Comments”中加入方法的信息(如:方法的用途等)。
    ●   單擊Ok 進(jìn)入下一畫面。
    3、泵參數(shù)設(shè)定:(以二元泵為例)
    ●  在“Flow”處輸入流量,如1ml/min,在“Solvent B”處輸入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,編輯梯度。在“Pressure Limits Max”處輸入柱子的最大耐高壓,以保護(hù)柱子。
         ●  單擊Ok進(jìn)入下一畫面。
    4、自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定:
    ●  選擇合適的進(jìn)樣方式, 如圖所示,進(jìn)樣體積 1.0ul ,洗瓶位置為6號(hào)。“Standard Injection”----只能輸入進(jìn)樣體積,此方式無(wú)洗針功能。“Injection with Needle Wash”----可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置,此方式針從樣品瓶抽完樣品后,會(huì)在洗瓶中洗針。“Use injector program”---可以點(diǎn)擊Edit 鍵進(jìn)行進(jìn)樣程序編輯。
    ●  點(diǎn)擊Ok進(jìn)入下一畫面。
    5、柱溫箱參數(shù)設(shè)定:
          ●  在”Temperature”下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點(diǎn)擊”more>>” 鍵,如圖所示,選中”Same as left”---使柱溫箱的溫度左右一致。
           ●  點(diǎn)擊ok進(jìn)入下一畫面。
    6、VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:
          ●  在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),如254nm,  在”Peak width (Response time)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間, 如>0.1min  (2s)。
           ●  在Timetable 中可以“Insert”一行,輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng),如1min  ,波長(zhǎng)=300nm。點(diǎn)擊ok進(jìn)入下一畫面。
    7、DAD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:
    ●     檢測(cè)波長(zhǎng): 254nm,BW=30nm,     參比波長(zhǎng)=350nm,BW=100nm; 
    ●     檢測(cè)波長(zhǎng):一般選擇最大吸收處的波長(zhǎng)。樣品帶寬BW: 一般選擇最大吸收值一半處的整個(gè)寬度。參比波長(zhǎng):一般選擇在靠近樣品信號(hào)的無(wú)吸收或低吸收區(qū)域。參比帶寬BW:至少要與樣品信號(hào)的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。Peak width(Response time):其值盡可能接近要測(cè)的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄,光譜分辨率高;寬時(shí),噪音低。同時(shí)可以輸入采集光譜方式,步長(zhǎng),范圍,閾值。選中所用的燈。
    ●    點(diǎn)擊Ok進(jìn)入下一畫面。
    8                RID檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:
    ●    色譜條件:  
    進(jìn)樣體積: 20ul 。      光學(xué)單元溫度:  Off 。
    極性: 正 。           峰寬(響應(yīng)時(shí)間) :  4s  。
    ●  如圖所示: “Optical Unit Temperature”---若環(huán)境溫度控制在±2℃,設(shè)定為Off,  若環(huán)境溫度不穩(wěn)定,則設(shè)定光學(xué)單元溫度為高于環(huán)境溫度5度,以防樣品在池中沉淀。“Peak width”---大多數(shù)分析設(shè)為4S,只有在高速分析下設(shè)為更短。“Automatic recycling after analysis”---在不進(jìn)行分析時(shí)可以讓流動(dòng)相循環(huán),節(jié)省流動(dòng)相,檢測(cè)器連續(xù)運(yùn)行,可隨時(shí)投入使用。
     ●   ***** 點(diǎn)擊RID圖標(biāo),選擇RID  Control :Heater 設(shè)為On,若要循環(huán)流動(dòng)相,必須將“Recycling Valve”設(shè)為ON。手動(dòng)purge 參比池,將其設(shè)為On,并輸入Purge 時(shí)間。 
    9                FLD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:
     色譜條件: 
     ●   樣品:P/N 01018-68704  用甲醇稀釋為1:10。
     ●    進(jìn)樣體積:5ul。
     ●    柱溫箱:  30℃ 。   EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。
     ●    響應(yīng)時(shí)間=4s.     停止時(shí)間: 出峰完畢。
     ●    Excitation A: 激發(fā)波長(zhǎng):200-700nm,步長(zhǎng)為1nm,或Zero Order。
     ●    Emission:     發(fā)射波長(zhǎng): 280-900nm, 步長(zhǎng)為1nm,或Zero Order。
     ●    PMT:          大多數(shù)應(yīng)用適當(dāng)?shù)脑O(shè)定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少 PMT 值。
     ●  “Peak width”:大多數(shù)應(yīng)用設(shè)為4s,只有快速分析采用小的設(shè)定值。
     ●    Multi Ex 多波長(zhǎng)及光譜(激發(fā))。
     ●    Multi Em多波長(zhǎng)及光譜(發(fā)射)。
     ●    同時(shí)可以輸入范圍Range、步長(zhǎng)step、采集光譜。
    10、        在“ Run time checklist ”中選中“Data acquisition”,單擊Ok。
    11、        單擊“Method”菜單,選中“Save method as”,輸入一方法名,如“test”,單擊Ok。
    12、        從菜單 “View”中選中”O(jiān)nline signal” ,選中Windows 1,然后單擊Change 鈕,將所要繪圖的信號(hào)移到右邊的框中,點(diǎn)擊Ok.(如同時(shí)檢測(cè)二個(gè)信號(hào),則重復(fù)12,選中
    Windows 2)。
    13、        從“Run  control ”菜單中選擇“Sample info”選項(xiàng),如上圖所示,輸入操作者名稱,在“Data file ”中選擇“Manual”或“Prefix”。
    區(qū)別:    Manual--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會(huì)將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。   Prefix—在Prefix 框中輸入前綴,在Counter 框中輸入計(jì)數(shù)器的起始位,儀器會(huì)自動(dòng)命名,如vwd0001,vwd0002……。
    14、        從Instrument 菜單選擇System on
    15、        等儀器Ready,基線平穩(wěn),從Method菜單中選擇“Run method”,進(jìn)樣。
    (DAD, VWD色譜圖如下所示:)
    (三)、數(shù)據(jù)分析方法編輯:
    1、  從“View”菜單中,單擊“Data analysis”進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面。
    2、  從“File”菜單選擇“Load signal”,選中您的數(shù)據(jù)文件名,如下圖所示。單擊Ok。
    3、  做譜圖優(yōu)化,從“Graphics”菜單中選擇“Signal options”選項(xiàng),。從Ranges中選擇Auto scale及合適的顯示時(shí)間,單擊ok,或選擇”Use Ranges” 調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行,直到圖的比例合適為止。
    4、積分:
     (1)、從“Integration”中選擇 “Auto integrate”,如積分結(jié)果不理想,再?gòu)牟藛沃羞x擇“Integration  Events”選項(xiàng),選擇合適的Slope sensitivity,Peak width,Area reject,Height reject。
     (2)、從“Integration”菜單中選擇“Integrate”選項(xiàng), 則數(shù)據(jù)被積分。
     (3)、如積分結(jié)果不理想,則修改相應(yīng)的積分參數(shù),直到滿意為止。
     (4)、單擊左邊“√”圖標(biāo),將積分參數(shù)存入方法。
    5、打印報(bào)告:
    (1)、從“Report”菜單中選擇“Specify report”選項(xiàng),進(jìn)入如上畫面。
    (2)、單擊“Quantitative  Results”框中Calculate右側(cè)的黑三角,選中Percent(面積百分比),其它選項(xiàng)不變。
    (3)、單擊Ok.
    (4)、從“Report”菜單中選擇“Print report”,則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機(jī)上,則單擊Report 底部的“Print”鈕。
    (四)、關(guān)機(jī):
     
    ●  關(guān)機(jī)前,用 100%的水沖洗系統(tǒng)20分鐘,然后用有機(jī)溶劑沖洗系統(tǒng)10分鐘(如ACN),然后關(guān)泵,(適于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]
    ●  退出化學(xué)工作站,及其它窗口,關(guān)閉計(jì)算機(jī)(用shut down關(guān))。
    ●  關(guān)掉Agilent 1100電源開關(guān)。

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